TRIM28增强非小细胞肺癌氧化应激耐受及其机制研究

研究背景:肺癌是全世界发病率和致死率*高的恶性肿瘤，其发生发展、转移、复发到化疗耐受都与癌细胞对氧化应激的耐受有关，因此寻找影响肺癌氧化应激耐受的关键分子成为研究焦点。*新研究发现 TRIM 蛋白家族是重要的调节因子，其中 TRIM28 在肿瘤的发生发展中有着重要的作用。目的:鉴定 TRIM28 在肺中的表达通过体内外实验探讨该基因的生物学功能，研究肺癌细胞 TRIM28

表达与氧化应激耐受的关系并探讨其可能的机制。方法:实时荧光定量PCR 和免疫组化鉴定 TRIM28 的表达RNA 于扰技术抑制 TRIM28 表达后，MTT技术和克降形成实验研究细胞增，流式细胞术分析细胞周期;鼠成实验研究 TRIM28 稳定干扰后的成情况并通过 TUNEL 技术分析癌细胞亡。利用 ROS 特异的光对 H202 刺下的细胞进行染色，在荧光显微镜下观察以及流式细胞仪检测TRIM28 表达变化对氧化应下细胞内 ROS 累积的影Westerm-blot 检测 202刺激TRIM28 RNA 于扰后的肺癌细胞中总 Akt、磷酸化Akt 水平，P13K 活性以及 P53mTOR、GSK3BADFKHR和NFKB表达水平的变化。

结果:TRIM28mRNA在8种非小细胞肺癌细胞系和肺痛织中显著高表达。组化结果发现48 例非小细胞肺癌组织中，29 例(50.0%)TRIM28 蛋白表达阳性。PAa 和 SK-MES-1细胞转染TRIM28 siRNA 后，显著抑制细胞的活性(P   0.05),并具时间依赖性;克隆形成数分别为 215 个和130个,显著低于对照组(504个,P < 0.05)GO/G1期比例明显高于对照组而S 期和G2M 期比例下降与对照组比较，注射稳定转染 TRIM28SiRNA细胞的裸鼠肿瘤生长速度慢，形成肿块体体积小;Tuncl实验也证实肿块中细胞凋亡数目增多，具有显著差异。转染 TRIM28 siRNA 的肺癌细胞 ROS 累积增多，出现自发性细胞死亡;总Ak、酸化Akt 水平，PI3K 活性以及P53mTORGSK3、BAD、FKHRNFKB 表达水平降低。结论:TRIM28在非小细胞中高表达对的发生发展起到进作用机制可能是 TRIM28通过PI3K/AKt信号通路增强非小细胞肺癌的氧化应激耐受

关键词:非小细胞肺癌，TRIM28;氧化应